Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC)
- Los equipos de HPLC solo permiten desarrollar métodos analíticos y por el momento no es posible implementar métodos preparativos.
- Será responsabilidad única y exclusiva del académico a cargo del proyecto, la presentación de muestras previamente percoladas, filtradas y en su caso derivatizadas; en este sentido, cualquier daño provocado al equipo por una muestra que no cumpla con los requisitos para ser manejada en HPLC, será reparado con cargo al presupuesto de la dependencia a la cual esté adscrito el investigador responsable.
- Será responsabilidad única y exclusiva del investigador a cargo del proyecto, determinar las condiciones en que habrá de llevarse a cabo la separación de los componentes de la mezcla a analizar. Para ello tendrá que atender las siguientes consideraciones:
- a) Si el método esta disponible en la unidad SARA el análisis se efectuará conforme al calendario de recepción de la muestra.
- b) Si el método no está disponible en la unidad SARA, pero está reportado en la literatura, el usuario se encargará de obtenerlo y proporcionarlo.
- c) Si el método no está reportado, el investigador junto con el personal academico de la Unidad SARA, propondrán el método de análisis y sus posibles modificaciones. La implementación del método requerirá de un tiempo razonable, por lo que el análisis de las muestras de interés se efectuará una vez desarrollado el método.
- En caso de que la unidad SARA no cuente con los estándares requeridos por el usuario será responsabilidad del mismo suministrarlos. En tal caso permitirá que tales estándares puedan ser utilizados en análisis de muestras de otros usuarios y por ende estarán bajo resguardo de la Unidad SARA.
- El usuario deberá proporcionar la información que se requiera en el formato correspondiente, en caso de que faltase algún apartado de la misma, tendrá que explicar la razón utilizando el reverso del formato.
- En ningún caso será posible procesar muestras mediante HPLC en horarios no hábiles.
- Las muestras deberán ser presentadas en viales previamente limpiados por ultrasonido y etiquetados con la clave de la muestra.
Cromatografía de Gases Acoplada a Espectrometría de Masas (GC/MS)
- El equipo en cuestión permite realizar análisis de mezclas a la temperatura estándar en GC o mediante el uso de hasta 3 rampas de temperatura.
- La estación de trabajo que manipula la adquisición de cromatogramas y espectros de masas, cuenta con una base de datos (NIST) que contiene aproximadamente 74,900 espectros de masas de compuestos orgánicos.
- En razón de lo anterior es posible realizar la identificación cualitativa de uno o mas de los componentes de una mezcla por comparación de su espectro de masas con los considerados en la base de datos. Una identificación mas confiable puede efectuarse si el usuario suministra el estándar de referencia para los compuestos cuya presencia pretenda determinar.
- El GC-MS de la unidad SARA carece de capacidad para el análisis por inserción directa y solo maneja la técnica de ionización por impacto electrónico.
- Será responsabilidad única y exclusiva del académico a cargo del proyecto, la presentación de muestras previamente percoladas, filtradas y en su caso derivatizadas; en este sentido, cualquier daño provocado al equipo por una muestra que no cumpla con los requisitos para ser manejada en cromatogarfia de gases, será reparado con cargo al presupuesto de la dependencia a la cual esté adscrito el investigador responsable.
- Será responsabilidad única y exclusiva del investigador a cargo del proyecto, determinar las condiciones en que habrá de llevarse a cabo la separación de los componentes de la mezcla a analizar. Para ello tendrá que atender las siguientes consideraciones:
- a) Si el método esta disponible en la unidad SARA el análisis se efectuará conforme al calendario de recepción de la muestra.
- b) Si el método no está disponible en la unidad SARA, pero está reportado en la literatura, el usuario se encargará de obtenerlo y proporcionarlo.
- c) Si el método no está reportado, el investigador junto con el personal académico de la Unidad SARA, propondrán el método de análisis y sus posibles modificaciones. La implementación del método requerirá de un tiempo razonable, por lo que el análisis de las muestras de interés se efectuará una vez desarrollado el método.
- En caso de que la unidad SARA no cuente con los estándares requeridos por el usuario será responsabilidad del mismo suministrarlos. En tal caso permitirá que tales estándares puedan ser utilizados en análisis de muestras de otros usuarios y por ende estarán bajo resguardo de la Unidad SARA.
- El usuario deberá proporcionar la información que se requiera en el formato correspondiente, en caso de que faltase algún apartado de la misma, tendrá que explicar la razón utilizando el reverso del formato.
- En ningún caso será posible procesar muestras mediante GC/MS en horarios no hábiles.
- Las muestras deberán ser presentadas en viales previamente limpiados por ultrasonido y etiquetados con la clave de la muestra.
Resonancia Magnética Nuclear (RMN)
- El investigador responsable del proyecto autorizado por el Consejo Asesor, recibirá a manera de préstamo y mediante vale que asegure su recuperación en las condiciones de entrega, no mas de 2 tubos para muestra de RMN. En casos especiales y bajo las mismas condiciones, se proporcionaran hasta 3 tubos más, con el compromiso de que al término del experimento serán devueltos sin daño alguno. En cualquier caso, la limpieza de los tubos la llevará a cabo el usuario en sus propias instalaciones, así como la preparación de las muestras.
- En primera instancia, se sugiere el uso de Cloroformo Deuterado (CDCl3) como disolvente, que contenga aproximadamente 1% de tetrametilsilano (TMS) para muestras de rutina. El TMS será proporcionado por la Unidad SARA.
- Cada dependencia que requiera del uso de este equipo recibirá 100 g (67 ml) de cloroformo deuterado (CDCl3), que le será suficiente para la preparación de no menos de 130 muestras, si se considera que la preparación adecuada de una muestra requiere de aproximadamente 0.5 ml de disolvente. La botella del disolvente será entregada al director de su Dependencia y el manejo apropiado del mismo será reglamentado al interior de la propia dependencia.
- Habida cuenta de que el costo de los disolventes para RMN se incrementa en correspondencia con el número de hidrógenos sustituidos por deuterio, otro tipo de disolventes sólo estarán disponibles en la Unidad SARA. Al respecto, se cuenta con los siguientes disolventes deuterados para uso en aplicaciones específicas:
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Disolvente
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Fórmula
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| Acetona |
(CD3)2CO
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| Metanol |
CD3OD
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| Dimetilsulfóxido |
(CD3)2SO
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| Oxido de deuterio |
D2O
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| Diclorometano |
CD2Cl2
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| Acetonitrilo |
CD3CN
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| Benceno |
C6D6
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- La preparación de muestras que requieran de estos disolventes deberá ser efectuada en las instalaciones de la Unidad SARA. Por ningún motivo, la botella del disolvente se proporcionará al investigador para que prepare sus muestras fuera de la Unidad, ni se le proporcionarán los insumos para hacerlo.
- Se cuenta actualmente con reactivos de desplazamiento no quiral (EuFOD), y quiral Tris[3-(heptafluoropropilhidroximetilen)-4-canforato] de europio), que podrán ser utilizados por los investigadores, habiendo justificado anteriormente la pertinencia del experimento en el formato correspondiente. La preparación de la muestra y la adición de los reactivos de desplazamiento serán realizadas por el usuario.
- La pureza de las muestras será determinante del tipo de experimento solicitado; de manera rutinaria se determinará inicialmente el espectro de RMN 1H, sin embargo, la determinación del espectro de 13C quedará a criterio del operador del equipo, toda vez que al observar impurezas (disolventes u otros compuestos) en el espectro de 1H, considere que la información del espectro de 13C sería ambigua e inútil. Lo anterior se comunicará al investigador a la brevedad posible, con el fin de darle la oportunidad de tratar nuevamente su muestra y enviarla a la Unidad SARA para su análisis, dicha muestra recibirá una nueva clave de muestra y deberá esperar turno antes de ser analizada. La pureza de la muestra no se tomará en cuenta si se pretende realizar un análisis de mezclas (evaluación de la diastereoselectividad o presencia de algún metabolito, por ejemplo), siempre y cuando se haga la observación en el formato correspondiente.
- Las características de la muestra a analizar por RMN (peso de la muestra, número de carbonos, solubilidad) y el tipo de experimento solicitado determina el tiempo de maquina requerido para el análisis. En razón de lo anterior, durante el horario hábil de la Unidad SARA (9:00 a 17:00 hrs de lunes a viernes), sólo será posible disponer de hasta 2 hrs de tiempo de máquina para la adquisición de espectros, sin importar el experimento solicitado.
- Las muestras que requieran de más de 2 hrs para su análisis serán procesadas cuando se cumplan las siguientes normas:
- a) Siempre y cuando, durante el horario hábil no existan muestras en espera.
- b) En cualquier caso, si el investigador responsable solicita tiempo de máquina con 10 días hábiles de anticipación.
