eNeurobiología - Revista electrónica

Vesículas seminales
En macho pseudohermafrodita. La estructura fue lobular trabecular. La cápsula era miofibrosa con proyecciones centrales que contenían septos trabeculares limitados de epitelio transicional. Se encontró infiltrados inflamatorios transmurales y luminales de tipo mixto: neutrofílico, eosinofílico, linfoplasmocítico e histiocítico. También había ectasia ductal con presencia de corpora arenaceae

En macho control. Presencia de adventicia de epitelio plano simple, posiblemente seroso. Debajo de este se encontró una gruesa capa de músculo liso. Hacia la túnica íntima de encontraron proyecciones de tejido conectivo y mioepitelio que daban aspecto de trabeculaciones. Epitelio glandular abundante. Presencia de secreciones azurófilas tipo lacunae.

Glande

En macho pseudohermafrodita. En un corte longitudinal. El epitelio fue plano estratificado queratinizado que formaba papilas o plicas córneas dispuestas craneocaudalmente. Se observó poca o nula presencia de tejido glandular. En el extremo libre se observó una depresión semejante a una fóvea, totalmente revestida del mismo epitelio estratificado plano queratinizado, incluyendo las plicas. Había presencia de uretra peneana, y se encontraron algunas fibras y tejido eréctil en el centro del pene. El centro del glande y pene es de tejido conectivo laxo. Hacia la base se observó musculatura estriada y un centro de tejido especialidado: hueso formando un verdadero os penis. Se observó prepucio y el fórnix prepucial que es identificado exactamente en la zona donde el epitelio peneano se diferencia en epitelio mucosal prepucial. Sobre la cara externa o cutánea del prepucio es diferenciable parte de la fascia dartoica y las glándulas anexas de piel orientadas hacia ésta última. Se aprecia un saco o divertículo que aparenta ser un divertículo prepucial.

En macho control. Prepucio limitado de epitelio plano estratificado queratinizado por la cara mucosal. Se observaron glándulas de tipo sebáceo, posiblemente prepuciales. El endotelio prepucial estaba altamente queratinizado, incluso cornificado con depresiones o fosas que coincidían perfectamente con las plicas cornificadas del glande. Por la forma que se observó, se identificó que las plicas no eran perpendiculares al cuerpo del glande, sino oblicuas, ya que se orientaban de forma inclinada. El cuerpo del glande presentó tejido conectivo, colágena y vasos sanguíneos con una estructura eréctil. En la cara ventral del glande se observó la uretra, la cual estaba limitada por epitelio plano estratificado queratinizado. Ventral a ésta, se encuentró tejido conjuntivo diferenciado en hueso verdadero, el cual mostró matriz osteoide, osteocitos y osteoblastos, aunque no fue identificable la presencia de osteonas. Esta estructura ósea se ubicó totalmente ventral al cuerpo del pene y tenía acomodo concéntrico centrífugo hacia la porción dorsal, siendo bien diferenciado en hueso hacia ventral y poco diferenciado como mesenquimatoso hacia dorsal, para realizar colindancia con la uretra. El hueso peneano podría tener en realidad dos ramas divergentes o convergentes, o incluso hasta podría ser un hueso dorsal y uno ventral, ya que en algunos cortes se observaron dos huesos en acomodo dorsal y ventral divididos por tejido conjuntivo no diferenciado.

Región Bulboespojosa

En macho pseudohermafrodita. Se observó un corte transverso de estructuras tubulares. El perfil del espécimen fue semielíptico rodeado casi en su totalidad de tejido muscular estriado. Al centro de la elipse se observaron estructuras tubulares. Alineadas en el ecuador del huso de corte se observó en un lado, una estructura tubular rodeada de músculo estriado, teniendo fibras longitudinales hacia el lumen, mientras que otra capa adventicia a la anterior las tiene transversas. El interior de este tubo se encuentra formado por tejido epitelial transicional en acomodo papilar y distribución trabecular. Supone ser la uretra. Al centro del huso, dorsal tubo anterior, existen dos tubos cortados transversalmente, los cuales están divididos por un septo de tejido conectivo denso y rodeado cada tubo por tejido conectivo laxo y miofibras lisas. El interior de cada tubo contiene epitelio glandular y se aprecian cúmulos semejantes a corpora amilacea. Este supone ser la desembocadura de los colículos seminales, justo antes de anastomosar a la uretra. En el otro extremo del polo del corte se observaron estructuras tubulares dispersas más o menos simétricas. Todas tienen epitelio glandular e infiltrados inflamatorios luminales. Se observó mucha corpora amilacea en el lumen de estas estructuras. También se observó congestión vascular, cristales de hemosiderina y hemosiderófagos en el tejido intersticial a los ductos. Coinciden con tejido glandular prostático.

En macho control. Estructura eminentemente muscular y cavernosa eréctil. El tejido muscular fue de tipo estriado esquelético en diversas direcciones, pero sin mezclar las fibras. Se observaron cuerpos esponjosos vasculares y un centro de conducto uretral limitado de epitelio de transición. Se observó una zona glandular en una de las paredes de dicho conducto. Posiblemente tejido glandular uretral diseminado en el dorso de la misma. Se encontraron dos glándulas periféricas, posiblemente dorsolaterales de tipo tubuloalveolar que emanan una secreción azurófila, posiblemente proteinácea, hacia la luz de sus respectivos tubos, los cuales están delimitados de epitelio cúbico simple. Muy parecidas a glándulas bulbouretrales.

3.4. Dimorfismo sexual cerebral

El cerebro de la rata experimental (macho pseudohermafrodita) y los cerebros de un macho normal y una hembra normal se procesaron para ser teñidos con la técnica de Nissl. Primero se pinzó la aorta descendente y se administró transcardialmente (ventrículo izquierdo) una solución 500 ml al 0.9% con heparina (0.010 mg/L) como anticoagulante a temperatura de 4°C, posteriormente se administró 500 ml de la solución fijadora compuesta de paraformaldehido al 4%, disuelta en un amortiguador de fosfato de sodio 0.1 M (pH=7.4) a temperatura de 4°C. Terminada la perfusión se decapitó al animal, se extrajo el cerebro y el tejido se dejó 12 h en post fijación en la misma solución fijadora. Para la crioprotección, el tejido se colocó cada 24 h en solución de sacarosa al 10, 20 y 30% hecha en solución amortiguadora de fosfato de sodio 0.1 M. durante 24 h en cada solución y se mantuvo en  refrigeración (4° C). Se obtuvieron cortes coronales de 40 micras de grosor, usando un crióstato LEICA 1850 a una temperatura de -25 °C para proteger el tejido. Los cortes se montaron y los portaobjetos fueron sumergidos en las soluciones siguientes: agua destilada (1 minuto), violeta de cresilo (15 min), alcohol etílico al 70% (30 segundos), alcohol etílico al 95% (15 seg), alcohol etílico al 100 % (5 seg) y xileno (30 seg). Después de secarse se colocó permount y un cubreobjetos sobre las laminillas. Se tomaron imágenes digitales por medio de un microscopio de luz con objetivo 4X y se analizó el área en micras cuadradas de dichas estructuras con ayuda del programa Sigma SCAN Pro 4.  Se incluyeron estructuras previamente reportadas como sexualmente dimórficas, las cuales fueron identificadas de acuerdo a los planos de un atlas del cerebro de rata¹⁴: Núcleo sexualmente dimórfico del área preóptica media (SDN-MPOA por sus siglas en inglés) plano 22,⁷ Núcleo ventromedial del hipotálamo (VMH) con sus tres subdivisiones dorsomedial, central y ventrolateral, plano 29 y 30,¹⁵ amígdala medial posterodorsal (MePD) plano 31 y 32.¹⁶ Así mismo, para corroborar nuestras medición se incluyeron algunas estructuras que no son sexualmente dimórficas: Núcleo supraquiasmático (SCN) plano 22 y 23 y Núcleo supraóptico (SON) plano 23 y 24.^7,17  Se tomaron de 3-5 fotos de cada estructura, las cuales se midieron tres veces por un investigador que desconocía el origen de la imagen para evitar subjetividad en los resultados. Se obtuvo el promedio de todas las imágenes para cada estructura y se convirtieron en porcentaje relativo al valor obtenido en el macho normal. Debido a que sólo se midieron 3 animales (un macho, una hembra y el macho pseudohermafrodita) los resultados no se sometieron a ninguna prueba estadística inferencial, por lo tanto solamente se discuten en relación a la estadística descriptiva.

3.5. Resultados dimorfismo cerebral

Los resultados de las estructuras sexualmente dimórficas se muestran en la Figura 3 y en la Tabla 2. Como era de esperarse la hembra tuvo valores inferiores al macho en NSD-MPOA, VMH, y MePD, las cuales fueron previamente reportadas como sexualmente dimórficas. El macho pseudohermafrodita tuvo valores inferiores solo en NSD-MPOA y MePD, pero no en el VMH (Figura 3 A, B, C). Cuando se evaluaron las subregiones del VMH se observó que el macho pseudohermafrodita tuvo valores por arriba del macho normal en la región central y ventrolateral. Como era también de esperarse, en las estructuras que no han sido reportadas como sexualmente dimórficas (SQN y SON) no se observaron diferencias con valores porcentuales mayores a 4% entre los tres animales.

La Figura 3, muestra las estructuras cerebrales relacionadas con el dimorfismo sexual en el macho (Figura 3A), en la hembra (Figura 3B) y en el  macho pseudohermafrodita (Figura 3C). Las imágenes de la izquierda (A1, B1, C1) muestran el área preóptica medial con el núcleo sexualmente dimórfico (flecha negra) y el núcleo supraquiasmático (flecha blanca). Las imágenes de la derecha (A2, B2, C2) muestran el hipotálamo ventromedial (flecha punteada). Las áreas de los diferentes núcleos se muestran en la Tabla 2. En la hembra las áreas de los núcleos considerados sexualmente dimórficos: núcleo sexualmente dimórfico del área preóptica media (NSD-MPOA), hipotálamo ventromedial (VHM) y la amígdala medial postero dorsal (MePD) fueron menores un 49.5%, 25.8% y 14.9% con respecto al macho control. El macho pseudohermafrodita tuvo valores inferiores solo en NSD-MPOA (31.6%) y MePD (16.2%), pero no en el VMH (Figura 3 A, B, C y Tabla 2). En relación con las áreas de las subregiones hipotalámicas del núcleo ventromedial (central y ventrolateral) se encontró que en el macho pseudohermafrodita las áreas fueron ligeramente más grandes que las del macho control.  Las áreas de las estructuras que no han sido reportadas como sexualmente dimórficas (núcleos supraquiasmáticos y supraópticos fueron semejantes en los tres animales.

Figura 3. Cortes coronales de cerebros de un macho (A), una hembra (B) y el macho pseudohermafrodita (C), teñidos con Nissl. Las imágenes de la izquierda (A1, B1, C1) muestran el área preóptica media con el núcleo sexualmente dimórfico (flecha negra) y el núcleo supraquiasmático (flecha blanca). Las imágenes de la derecha (A2, B2, C2) muestran el hipotálamo ventromedial (flecha punteada). 3v (tercer ventrículo), ox (quiasma óptico).

Tabla 2. Dimorfismo cerebral. Área en micras cuadradas de diferentes estructuras sexualmente dimórficas: NSD-MPOA= núcleo sexualmente dimórfico del área preóptica media; VMH= hipotálamo ventromedial; MePD= amígdala medial posterodorsal, y otras estructuras no sexualmente dimórficas: SON= núcleo supraóptico del hipotálamo, SQN= núcleo supraquiasmático. Los valores obtenidos en el macho normal se consideraron el 100% y en relación a ese valor se obtuvieron los porcentajes de hembra y macho pseudohermafrodita

Inicio

4. Discusión

En el presente estudio evaluó la preferencia de pareja sexual de una rata macho con pseudohermafroditismo, la histología de los órganos sexuales y accesorios y el tamaño de los núcleos cerebrales relacionados con el dimorfismo sexual. 

Preferencia sexual

Los datos conductuales indicaron que la preferencia sexual del macho pseudohermafrodita puede considerarse como bisexual, en función de la presencia de un macho o una hembra de manera individual, o de la presencia simultánea de un macho y una hembra. En la Prueba de Pareja 1, cuando la exposición ocurrió de manera separada a un macho y a una hembra, la rata pseudohermafrodita se comportó mayoritariamente femenina al aceptar montas del macho y responder con lordosis. En la Prueba de Pareja 2, con exposición a un macho y una hembra simultáneamente, la rata pseudohermafrodita se comportó mayoritariamente masculina al realizar montas a la hembra, pero también desplegó conductas de proceptividad femenina (i.e. brincos y carreras cortas) y receptividad (i.e. lordosis) hacia el macho y la hembra, es decir, de manera bisexual, auque su conducta sexual en general fue deficiente, comparada con animales normales.

En estudios previos con machos pseudohermafroditas insensibles a andrógenos (testicular feminization mutant, tfm) se ha observado que actúan como hembras normales, aunque a veces no muestran preferencia sexual a pesar de haber sido tratados con estrógenos.¹⁸ Además, cuando esos machos pseudohermafroditas fueron expuestos a orina de machos normales, respondieron al igual que las hembras con mayor inmunoreactividad a c-Fos en el área preóptica media del hipotálamo, lo cual sugiere que al igual que ellas se motivan con la presencia de señales masculinas, es decir, presentaban un cerebro feminizado. Otro estudio mostró que machos tfm castrados neonatalmente mostraron un incremento en la lordosis, comparados con machos tfm intactos,¹⁹ lo cual indica que la ausencia de andrógenos perinatales aunado a la insensibilidad a estos en la edad adulta facilita el despliegue de conductas femeninas. Dichas conductas pueden observarse en machos normales que fueron gonadectomizados en el periodo perinatal temprano y posteriormente tratados con estrógenos en la edad adulta.²⁰ Para que un macho realice lordosis se requiere que en el periodo crítico perinatal su cerebro no haya sido expuesto a andrógenos o estrógenos, lo cual facilita la organización de un cerebro femenino. En la edad adulta el tratamiento hormonal activará conductas que dependen de neurocircuitos organizados perinatalmente. En caso de presencia perinatal de andrógenos el cerebro se organiza como masculino y dichas hormonas activarán conductas masculinas en la edad adulta.³

Histología de los órganos sexuales

Los hallazgos histológicos corresponden a un macho pseudohermafrodita. Fenotípicamente la rata parecía tener vagina y clítoris (Figura 1C). Sin embargo, la histología gonadal mostró ser de un macho (Figura 2B) con presencia de epidídimo, próstata, vesículas seminales, glande, y pene, aunque este último de aspecto macroscópico anormal. Además, se encontraron espermatozoides en túbulos seminíferos y epidídimo.

Dimorfismo Cerebral

Los resultados de tres estructuras sexualmente dimórficas indicaron que la rata pseudohermafrodita tenía un cerebro más parecido al de una hembra que al de un macho. Los valores encontrados en NSD-MPOA y MePD fueron inferiores al macho control, pero el VMH fue mayor. Como era de esperarse la hembra tuvo valores inferiores al macho control en las tres áreas. Cuando se evaluaron las subregiones del VMH del macho pseudohermafrodita se observó que tuvo valores porcentuales por arriba del macho normal en la región central y ventrolateral, pero no en la región dorsomedial. En base a estos hallazgos podemos sugerir que el dimorfismo cerebral del macho pseudohermafrodita pudiera reportarse como intermedio o intersexual en su organización, es decir, con algunas estructuras cerebrales más parecidas a las que presentan comúnmente los machos y otras más similares a las de una hembra promedio. Un dimorfismo intermedio pudiera explicar la conducta bisexual observada en las dos pruebas de preferencia de pareja.

El NSD-MPOA y la MePD controlan la conducta sexual masculina, así como el reconocimiento y la motivación social.^21,22 Se cree que la conducta masculina y la preferencia hacia las hembras pudiera ocurrir por la acción de un NSD-MPOA de gran tamaño (8 veces más grande en machos que en hembras)⁵ y una MePD 1.5 veces mayor.²³ Sin embargo, estas estructuras también controlan la conducta femenina^24-26 y los mecanismos de recompensa sexual por las intromisiones peneanas y por estimulación del clítoris.²⁷ Hasta ahora se especula que el volumen de dichas áreas afecta las aferencias y eferencias con otras regiones cerebrales, las cuales en conjunto facilitan la motivación por una pareja. En base a esa hipótesis reduccionista, es comprensible que en un macho pseudohermafrodita con un NSD-MPOA del 68% de tamaño y una MePD del 83% (en relación a un macho promedio) desplegara conducta bisexual. También es probable que el tamaño original de la MePD en el macho pseudohermafrodita fuera mucho menor al 83% en relación al macho normal, pues machos insensibles a andrógenos también tienen el volumen de la MePD de menor tamaño y los somas se observan parcialmente desmasculinizados.²⁸ Sin embargo, el tratamiento hormonal que recibió con estrógenos y progesterona pudieron haber incrementado el tamaño de la MePD, lo cual en teoría resultaría en un dimorfismo menos marcado. De acuerdo al efecto reportado por Cooke y colaboradores²⁹ es probable que el tratamiento exógeno con estrógenos aumente el volumen y el tamaño de los somas de la MePD. Así mismo, es importante discutir el efecto de las hormonas inyectadas en el despliegue de la conducta sexual en general del macho pseudohermafrodita. Es probable que sin el tratamiento hormonal la conducta sexual hubiera sido más deficiente o no se observara preferencia de pareja alguna.

El tamaño del VMH fue semejante en el macho normal y la rata pseudohermafrodita, mientras que en la hembra fue 25% más pequeño. Por el contrario, la región central y ventrolateral del macho pseudohermafrodita fueron 126% y 112% respectivamente mayores que en el macho normal. El VMH de un macho normal contiene una alta concentración de receptores a andrógenos comparado con hembras.³⁰ Además, regiones como la anterior (VMHa), dorsomedial (VMHdm), central (VMHc), y ventrolateral (VMHvl) expresan diferentes patrones de conexión hacia otras regiones cerebrales que pueden afectar diferentes funciones en la conducta.³¹  La región ventrolateral contiene muchas neuronas que expresan receptores a estrógenos, las cuales están involucradas en la respuesta de lordosis en las hembras. En algunos estudios con machos tfm se ha reportado un VMH de tamaño intermedio, por lo que se ha argumentado que el tamaño de dicha estructura depende de los receptores a andrógenos durante el desarrollo. En términos generales, podemos decir que el tamaño del VMH en el macho pseudohermafrodita conservó un tamaño masculino. Sin embargo, podemos especular que el incremento anormal en las porciones centrales y ventrolaterales, junto con el decremento anormal de SDN-MPOA y MePD fueron las responsables de la conducta de lordosis, y el comportamiento bisexual en general.

Inicio

5. Conclusión

Los resultados de este estudio indican que la rata macho pseudohermafrodita desplegó preferencia de pareja bisexual. Además, el análisis de las estructuras sexualmente dimórficas reveló que el SDN-MPOA y MePD tuvo organización femenina, pero en el VMH tuvo organización masculina. Estos hallazgos indican una organización cerebral bisexual, la cual concuerda con la preferencia sexual observada.

Inicio

6. Agradecimientos

Apoyo  SEP-CONACYT ciencia básica (167773) a GACA. Beca de doctorado (353271) a MBTS.

Inicio

7. Referencias

1. Androutsos G. Hermaphroditism in Greek and Roman antiquity. Hormones 2006 5: 214-7.
2. McEntee K. Reproductive pathology of domestic mammals. Academic Press, San Diego. 1990 pp 8-30.
3. Phoenix CH, Goy RW, Gerall AA, Young WC. Organizing action of prenatally administered testosterone propionate on the tissues mediating mating behavior in the female guinea pig. Endocrinology 1959 65: 369-82.
4. Davis EC, Shryne JE, Gorski RA. A revised critical period for the sexual differentiation of the sexually dimorphic nucleus of the preoptic area in the rat. Neuroendocrinology 1995 62: 579-85.
5. Gorski RA. Sexual differentiation of the brain. Hosp Pract 1978 13: 55-62.
6. Gorski RA. Sexual differenciation of the nervous system. En: Kandel ER y Jessell TM. (Ed.). Principles of Neural Science. 2000 pp 1131-1148.
7. Gorski RA, Gordon JH, Shryne JE, Southam AM. Evidence for a morphological sex difference within the medial preoptic area of the rat brain. Brain Res 1978 148: 333-46.
8. Gulia KK y Mallick HN. Homosexuality: a dilemma in discourse!. Indian J Physiol Pharmacol 2010 54: 5-20.
9. LeVay S. A difference in hypothalamic structure between heterosexual and homosexual men. Science 1991 253: 1034-7.
10. Roselli CE, Reddy RC, Kaufman KR. The development of male-oriented behavior in rams. Front Neuroendocrin 2011 32: 1034-1037.
11. Savic I, Berglund H, Lindstrom P. Brain response to putative pheromones in homosexual men. Proc Natl Acad Sci U S A 2005 102: 7356-61.
12. Swaab DF, Gooren LJ, Hofman MA. Brain research, gender and sexual orientation. J Homosexual 1995 28: 283-301.
13. Weinrich JD. Is homosexuality natural?. En: Paul W, Weinrich JD, Gonsiorek JC, Hotver ME (Ed.). Homosexuality: social, psychological and biological issues. Beverley Hills. 1982 pp 203.
14. Paxinos G y Watson C. The rat brain in stereotaxic coordinates. Academic Press, San Diego. 1998 pp 9-34.
15. Dugger BN, Morris JA, Jordan CL, Breedlove SM. Androgen receptors are required for full masculinization of the ventromedial hypothalamus (VMH) in rats. Horm Behav 2007 51: 195-201.
16. Zuloaga DG, Puts DA, Jordan CL, Breedlove SM.  The role of androgen receptors in the masculinization of brain and behavior: what we've learned from the testicular feminization mutation. Horm Behav 2008 53: 613-26.
17. Bloch GJ y Gorski RA. Estrogen/progesterone treatment in adulthood affects the size of several components of the medial preoptic area in the male rat. J Comp Neurol 1988 275: 613-22.
18. Bodo C y Rissman EF. Androgen receptor is essential for sexual differentiation of responses to olfactory cues in mice. Eur J Neurosci 2007 25: 2182-90.
19. Olsen KL. Induction of male mating behavior in androgen-insensitive (tfm) and Normal (King-Holtzman) male rats: effect of testosterone propionate, estradiol benzoate, and dihydrotestosterone. Horm Behav 1979 13: 66-84.
20. Segovia S, Garcia-Falgueras A, Perez-Laso C, Pinos H, Carrillo B, Collado P, Claro F, Guillamon A. The effects of partial and complete masculinization on the sexual differentiation of nuclei that control lordotic behavior in the male rat. Behav Brain Res 2009 196: 261-7.
21. Paredes RG. Medial preoptic area/anterior hypothalamus and sexual motivation. Scand J Psychol 2003 44: 203-12.
22. Bielsky IF y Young LJ. Oxytocin, vasopressin, and social recognition in mammals. Peptides 2004 25: 1565-74.
23. Cooke BM, Tabibnia G, Breedlove SM. A brain sexual dimorphism controlled by adult circulating androgens. Proc Natl Acad Sci U S A, 1999 96: 7538-40.
24. Coopersmith C, Gans SE, Rowe DW, Erskine MS.  Infusions of lidocaine into the amygdala, but not the preoptic area, block pseudopregnancy in the rat. J Neuroendocrinol 1996 8: 259-66.
25. Erskine MS. Mating-induced increases in FOS protein in preoptic area and medial amygdala of cycling female rats. Brain Res Bull 1993 32: 447-51.
26. Polston EK y Erskine MS. Excitotoxic lesions of the medial amygdala differentially disrupt prolactin secretory responses in cycling and mated female rats. J Neuroendocrinol 2001 13: 3-21.
27. Parada M, Chamas L, Censi S, Coria-Avila G, Pfaus JG. Clitoral stimulation induces conditioned place preference and Fos activation in the rat. Horm Behav 2010 57: 112-8.
28. Morris JA, Jordan CL, Dugger BN, Breedlove SM. Partial demasculinization of several brain regions in adult male (XY) rats with a dysfunctional androgen receptor gene. J Comp Neurol 2005 487: 217-26.
29. Cooke BM, Breedlove SM, Jordan CL. Both estrogen receptors and androgen receptors contribute to testosterone-induced changes in the morphology of the medial amygdala and sexual arousal in male rats. Horm Behav 2003 43: 336-46.
30. Matsumoto A y Arai Y. Sex difference in volume of the ventromedial nucleus of the hypothalamus in the rat. Endocrinol Jpn 1983 30: 277-80.
31. McClellan KM, Parker KL, Tobet S. Development of the ventromedial nucleus of the hypothalamus. Front Neuroendocrinol 2006 27: 193-209.

Inicio

Correspondencia:
*Centro de Investigaciones Cerebrales, Universidad Veracruzana, Av. Luis Castelazo Ayala s/n. Col Industrial Las Animas, Xalapa, Veracruz. Mexico: tel +52(228) 8418900 Ext 16309 email: gcoria@uv.mx

Este es un artículo de libre acceso distribuido bajo los términos de la licencia de Creative Commons, (http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0), que permite el uso no comercial, distribución y reproducción en algún medio, siempre que la obra original sea debidamente citada.

Inicio

Regresar